Rekwiżiti ta 'ġbir, ħażna u trasport ta' kampjuni għal esperimenti komuni

Rekwiżiti ta 'ġbir, ħażna u trasport ta' kampjuni għal esperimenti komuni

1. Ġbir u preservazzjoni ta' kampjuni patoloġiċi:

☛Sezzjoni ffriżata: Neħħi l-blokki tat-tessut xierqa u aħżinhom fin-nitroġenu likwidu;

☛Sezzjoni tal-paraffin: Neħħi l-blokki tat-tessut xierqa u aħżenhom f'4% paraformaldehyde;

☛Slajds taċ-ċelluli: Slajds taċ-ċelluli ġew iffissati f'4% paraformaldehyde għal 30 minuta, imbagħad sostitwiti b'PBS u mgħaddsa f'PBS u maħżuna f'4 °C.

2. Ġbir u preservazzjoni ta' kampjuni tal-bijoloġija molekulari:

☛Tessut frisk: Aqta 'l-kampjun u aħżen f'nitroġenu likwidu jew friġġ -80°C;

☛Eżemplari tal-paraffin: Aħżen f'temperatura tal-kamra;

☛Kampjun tad-demm sħiħ: Ħu ammont xieraq ta 'demm sħiħ u żid EDTA jew tubu tal-ġbir tad-demm ta' antikoagulazzjoni tal-eparina;

☛Kampjuni tal-fluwidu tal-ġisem: ċentrifugazzjoni b'veloċità għolja biex tiġbor is-sediment;

☛Kampjuni taċ-ċelluli: Iċ-ċelloli huma lisati bi TRizol u maħżuna f'nitroġenu likwidu jew friġġ ta '-80 °C.

3. Ġbir u ħażna ta’ kampjuni ta’ esperimenti ta’ proteini:

☛Tessut frisk: Aqta 'l-kampjun u aħżen f'nitroġenu likwidu jew friġġ -80°C;

☛Kampjun tad-demm sħiħ: Ħu ammont xieraq ta 'demm sħiħ u żid EDTA jew tubu tal-ġbir tad-demm ta' antikoagulazzjoni tal-eparina;

☛Kampjuni taċ-ċelluli: Iċ-ċelloli huma kompletament lisati b'soluzzjoni ta 'liżi taċ-ċelluli u mbagħad maħżuna f'nitroġenu likwidu jew friġġ ta' -80 °C.

4. Ġbir u ħażna ta' kampjuni ta' ELISA, radjoimmunoassay, u esperimenti bijokimiċi:

☛Kampjun tas-serum (plażma): Ħu demm sħiħ u żidu ma 'tubu ta' prokoagulazzjoni (tubu ta 'antikoagulazzjoni), ċentrifuga f'2500 rpm għal madwar 20 minuta, iġbor is-supernatant, u aħżen f'nitroġenu likwidu jew fi friġġ -80 ° C;

☛Kampjun ta 'l-awrina: ċentrifuga l-kampjun f'2500 rpm għal madwar 20 minuta, u aħżen f'nitroġenu likwidu jew friġġ -80 °C;irreferi għal dan il-metodu għal fluwidu toraċiku u axxite, fluwidu ċerebrospinali, u fluwidu tal-ħasil alveolari;

☛Kampjuni taċ-ċelluli: Meta tiskopri komponenti mnixxija, ċentrifuga l-kampjuni f'2500 rpm għal madwar 20 minuta u aħżinhom f'nitroġenu likwidu jew friġġ -80 ° C;meta tiskopri komponenti intraċellulari, Ħallat is-sospensjoni taċ-ċelluli b'PBS u ffriża u ħoll ripetutament biex teqred iċ-ċelluli u tirrilaxxa l-komponenti intraċellulari.Iċċentrifuga f'2500 rpm għal madwar 20 minuta u iġbor is-supernatant kif hawn fuq;

☛Kampjuni tat-tessuti: Wara li taqta 'l-kampjuni, iżenhom u ffriżahom f'nitroġenu likwidu jew friġġ ta' -80°C għal użu aktar tard.

5. Ġbir tal-kampjuni tal-metabolomika:

☛Kampjun ta 'l-awrina: Iċċentrifuga l-kampjun f'2500 rpm għal madwar 20 minuta u aħżen f'nitroġenu likwidu jew friġġ -80 ° C;irreferi għal dan il-metodu għal fluwidu toraċiku u axxite, fluwidu ċerebrospinali, fluwidu tal-ħasil alveolari, eċċ.;

☛Wara li taqta 'l-kampjun tat-tessut, iżenu u ffriżah f'nitroġenu likwidu jew friġġ ta' -80°C għal użu aktar tard;