Tubu ċentrifugu huwa tubu sempliċi li jista 'jiflaħ veloċità u pressjoni ta' rotazzjoni għolja, bħas-separazzjoni ta 'xi kampjuni u s-separazzjoni tas-sedimenti supernatanti.It-tubu taċ-ċentrifuga tal-ultrafiltrazzjoni għandu żewġ partijiet simili għat-tubu ta 'ġewwa u t-tubu ta' barra.It-tubu ta 'ġewwa huwa membrana b'ċertu piż molekulari.Waqt ċentrifugazzjoni b'veloċità għolja, dawk b'piż molekulari iżgħar se jnixxu fit-tubu t'isfel (jiġifieri t-tubu ta 'barra), u dawk b'piż molekulari akbar jinqabdu fit-tubu ta' fuq (jiġifieri t-tubu ta 'ġewwa).Dan huwa l-prinċipju tal-ultrafiltrazzjoni u ħafna drabi jintuża biex jikkonċentra l-kampjuni.
Tubi ċentrifugi ta 'l-ultrafiltrazzjoni ġeneralment jistgħu jintużaw mingħajr trattament minn qabel, iżda għall-ipproċessar tal-kampjuni tal-proteini, speċjalment għal soluzzjonijiet ta' proteini dilwiti (< 10ug / ml), ir-rata ta 'rkupru ta' konċentrazzjoni b'membrani ta 'ultrafiltrazzjoni ħafna drabi mhix kwantitattiva.Għalkemm il-materjali PES jimminimizzaw l-assorbiment mhux speċifiku, xi proteini, speċjalment meta jkunu dilwiti, jista 'jkollhom problemi.Il-grad ta 'rbit mhux speċifiku jvarja skond l-istruttura ta' proteini individwali.Proteini li fihom oqsma ċċarġjati jew idrofobiċi huma aktar probabbli li jorbtu b'mod irriversibbli ma 'uċuħ differenti.Pretrattament ta 'passivazzjoni fuq il-wiċċ tat-tubu ċentrifugu ta' ultrafiltrazzjoni jista 'jnaqqas it-telf ta' adsorbiment ta 'proteini fuq il-wiċċ tal-membrana.Fil-biċċa l-kbira tal-każijiet, it-trattament minn qabel tal-kolonna qabel ma tikkonċentra s-soluzzjoni tal-proteina dilwita jista 'jtejjeb ir-rata ta' rkupru, minħabba li s-soluzzjoni tista 'timla s-siti ta' assorbiment tal-proteini vojta esposti fuq il-membrana u l-wiċċ.Il-metodu ta 'passivazzjoni huwa li tixxarrab minn qabel il-kolonna b'volum ogħla ta' soluzzjoni ta 'passivazzjoni għal aktar minn siegħa, aħsel il-kolonna sewwa b'ilma distillat, u mbagħad ċentrifugaha darba b'ilma distillat biex tneħħi kompletament is-soluzzjoni ta' passivazzjoni li tista 'tibqa' fuq il-film .Oqgħod attent li ma tħallix il-film jinxef wara l-passivazzjoni.Jekk trid tużaha aktar tard, trid iżżid ilma distillat sterili biex iżżomm il-film niedja.
It-tubi ċentrifugi ta 'l-ultrafiltrazzjoni normalment ma jistgħux jiġu sterilizzati u użati mill-ġdid.Peress li l-prezz ta 'tubu wieħed mhuwiex irħis, ħafna nies jippruvaw jerġgħu jużawh - l-esperjenza hija li tnaddaf il-wiċċ tal-membrana b'ilma distillat għal ħafna drabi u tiċċentrifuha darba jew darbtejn.It-tubu żgħir li jista 'jiġi ċentrifugat bil-maqlub jista' jiġi mgħaddas f'ilma distillat u mbagħad ċentrifugat bil-maqlub għal aktar drabi, li se jkun aħjar.Jista 'jintuża għall-istess kampjun ripetutament, u jista' jiġi mxarrba f'ilma distillat meta ma jintużax, iżda għandha tiġi evitata l-kontaminazzjoni batterika.Tħallatx kampjuni differenti.Xi nies jgħidu li t-tixrib f'20% alkoħol u 1n NaOH (idrossidu tas-sodju) jista 'jipprevjeni t-tkabbir ta' batterji u jipprevjeni t-tnixxif.Sakemm il-membrana tal-ultrafiltrazzjoni tinvadi l-ilma, ma tistax titħalla tinxef.Madankollu, oħrajn jgħidu li se jeqred l-istruttura tal-membrana.Fi kwalunkwe każ, il-manifatturi ġeneralment ma jappoġġjawx l-użu mill-ġdid.L-użu ripetut se jimblokka d-daqs tal-pori tal-membrana tal-filtru, u saħansitra jikkawża tnixxija ta 'likwidu, li jaffettwa r-riżultati sperimentali.
Ħin tal-post: 05-Settembru 2022